人结核菌素抗体（PPD-Ab）ELISA试剂盒的原理、操作及注意事项

原理
人结核菌素抗体（PPD-Ab）ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）原理。在预先包被结核菌素（PPD）抗体的微孔中，依次加入待测样本、标准品和辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体。样本中的PPD抗体会与包被抗体和检测抗体形成夹心复合物。经过温育和洗涤后，加入底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色，并在酸的作用下转化为黄色。颜色的深浅与样本中的PPD抗体浓度呈正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），可以计算样本中PPD抗体的浓度。
操作
准备样本和标准品，按照说明书进行稀释。
取出所需板条，设置标准品孔和样本孔，加入相应的标准品和待测样本。
加入HRP标记的检测抗体，封住反应孔，进行温育。
洗涤后，加入底物A、B，避光孵育。
加入终止液，在450nm波长下测定各孔的OD值。
根据标准品浓度和OD值绘制标准曲线，计算样本浓度。
注意事项
试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验。
严格按照说明书操作，避免污染和误操作。
样本收集后应及时检测，如需保存，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融。
使用前请确保试剂盒在2-8℃保存，使用前室温平衡20分钟。
洗涤液如有结晶，属正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。